多酚的检测原理
中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物;用分光光度法测定其含量。
检测茶多酚的仪器和用具
实验室常规仪器及下列各项:分析天平: 感量0.0001g;分光光度仪。
检测茶多酚所用的试剂和溶液
所用试剂应为分析纯(AR),水为蒸馏水。
pH7.5磷酸盐缓冲液:磷酸氢钠: 称取23.377g磷酸氢二钠,加水溶解后定容至1L
磷酸二氢钾:称取9.078g磷酸二氢钾,加水溶解后定容至1L。
酒石酸亚铁溶液:称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠,用水溶解并定容至1L(溶液应避光,低温保存,有效期一个月)。
取上述磷酸氢二钾溶液85ml和磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。
检测茶多酚操作步骤
步骤一:取样按《茶取样》的规定取样。
步骤二:试样的制备按《茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定,制备试样。
步骤三:酒石酸亚铁溶液的制备按《茶水浸出物测定》中的规定,制备试液。
步骤四:pH7.5磷酸盐缓冲液测定准确吸取酒石酸亚铁溶液1mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL,充分混合,再加pH7.5的缓冲液至刻度。
步骤五:用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。
步骤六:结果计算 计算方法和公式茶叶中茶多酚的含量,以干态质量百分率表示。
步骤七:按下式计算: A×1.957×2 L1 茶多酚(%)=─×─×100 100 L2×M×m 式中: L1—试液的总量,mL; L2—测定时的用液量,mL; M—试样的质量,g; m—试样干物质含量百分率,%; A—试样的吸光度; 1.957—用10mm比色杯,当吸光度等于0.50时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
步骤八:如果符合重复性的要求,则取两次测定的算术平均值作为结果。 重复性同一样品的两次测定值之差,每100g试样不得超过0.5g。
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